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細胞培養的無菌環境

一、無菌室
無菌室的結構:一般由更衣間、緩沖間、操作間三部分組成。
無菌室的消毒和防污染:為保持無菌狀態,經常消毒是必要的,通常采用每日(使用前)紫外照射(12小時),每周甲醛、乳酸、過氧乙酸熏蒸(2小時)和每月新潔爾滅擦拭地面和墻壁一次的方式進行消毒。實際工作中,要根據無菌室建筑材料的差異來選擇合適的消毒方法。
此外,還應注意防止無菌室的污染。造成無菌室污染的可能包括:送入無菌室的風沒有被過濾除菌;進出無菌室時,能使外界空氣直接對流進無菌室的操作間;等。
二、超凈工作臺
工作原理:鼓風機驅動空氣通過高效過濾器得以凈化,凈化的空氣被徐徐吹過臺面空間而將其中的塵埃、細菌甚至病毒顆粒帶走,使工作區構成無菌環境。根據氣流在超凈工作臺的流動方向不同,可將超凈工作臺分為側流式、直流式和外流式三種類型。
超凈臺的使用與保養:超凈臺的平均風速保持在0.32-0.48/秒為宜,過大、過小均不利于保持凈化度;使用前最好開啟超凈臺內紫外燈照射1030分鐘,然后讓超凈臺預工作1015分鐘,以除去臭氧和使用工作臺面空間呈凈化狀態;使用完畢后,要用70%酒精將臺面和臺內四周擦拭干凈,以保證超凈臺無菌。還要定期用福爾馬林熏蒸超凈臺。