準備工作
一、制定培養方案
當我們準備培養一個菌株之前,首先要了解這個菌株的生長特性,確定該菌株的營養需求、生長溫度、氣體環境、滲透壓、酸堿度及嗜鹽性等條件,選擇合適的培養基和培養環境,制定活化培養方案。通常購買的菌株都附帶說明書,按照說明書推薦的培養基和培養條件來準備。若沒有說明書,可通過查閱文獻(推薦查看伯杰細菌手冊或常見細菌鑒定手冊)等方式確認菌株的生長條件,再制定方案。
二、菌株處理
獲得菌株后,原則上應盡早進行活化和保存。若不能立即活化,應按照說明書放入相應的環境中進行保存。若菌株為厭氧菌,請按厭氧菌培養要求在厭氧環境中操作。
(1)若保存的菌株為凍干粉形式,可加入少量生理鹽水或非選擇性肉湯培養基進行溶解懸浮,用劃線或涂布方式接種至平板,或著吸取菌液至液體培養基中進行培養。
(2)若保存的菌株為甘油凍存或液體保存形式,可在室溫速融后劃線或涂布接種至平板,或直接加入到液體培養基中進行培養。
(4)若保存的菌株為斜面或半固體形式,可直接挑取菌苔轉接至平板或液體培養基中進行培養。
三、活化菌株使用的培養基的成分通常包括以下幾個組分:
(1)基本營養成分,如蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉等,主要提供碳源、氮源及微量元素等;
(2)氯化鈉:維持一定的滲透壓環境;
(3)磷酸鹽:維持pH的相對穩定;
(4)特殊成分:如血清、半胱氨酸、氯化血紅素等,促進特定菌的生長。
根據菌株的生長特性,選擇合適的培養基或對特定的培養基添加成分進行改良,以滿足菌株的生長需求