四、液體和半固體接種法

1）液體接種法

包括從外面菌種接入培養(yǎng)液，或從液體菌種接入液體培養(yǎng)液，兩種情況都可以用接種環(huán)接種。但在培養(yǎng)量比較大的情況下，液體接種宜采用移液管接種，要求無菌操作。

左手持試管，右手將燒灼過的接種環(huán)伸入菌種管，待冷卻后，取菌液一環(huán)，立即移入培養(yǎng)基管中，在接近液面的管壁上輕輕研磨，然后將試管稍傾斜，并沾取少許液體調(diào)和，使菌液混合于培養(yǎng)基中(圖5，A)

2）半固體培養(yǎng)基接種法   

將燒灼過的接種針插入菌種管冷卻后，沾取菌液少許，立即垂直插入半固體培養(yǎng)基的中心至接近于管底處，但不可直刺至管底，然后循原路退出(圖5，B)。管口通過火焰，塞上棉塞，接種針燒灼滅菌后放下。

將上述已接種好的培養(yǎng)物，37℃度恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，24小時后取出觀察結(jié)果。

圖5

五、涂布接種法

用無菌移液管吸取菌懸液0.1mL，滴加于培養(yǎng)基平板上，右手持無菌涂布棒，左手拿培養(yǎng)皿，并用拇指將皿蓋打開一縫，在火焰旁右手持涂布棒與培養(yǎng)皿平板表面將菌液自平板中央均勻向四周涂布擴(kuò)散，切忌用力過猛將菌液直接推向平板邊緣或?qū)⑴囵B(yǎng)基劃破。接種后，將平板倒置于恒溫箱中，培養(yǎng)觀察。