2. 用法：加水至外筒內，被滅菌物品放入內筒。蓋上滅菌器蓋，擰緊螺旋使之密閉。滅菌器下用煤氣或電爐等加熱，同時打開排氣閥門，排凈其中冷空氣，否則壓力表上所示壓力并非全部是蒸汽壓力，滅菌將不完全。

待冷空氣全部排出后（即水蒸氣從排氣閥中連續排出時），關閉排氣閥。繼續加熱，待壓力表漸漸升至所需壓力時(一般是101.53 kPa，即15磅/英寸2，溫度為121.3℃)，調解爐火，保持壓力和溫度（注意壓力不要過大，以免發生意外），維持15~30 min。滅菌時間到達后，停止加熱，待壓力降至零時，慢慢打開排氣閥，排除余氣，開蓋取物。切不可在壓力尚未降低為零時突然打開排氣閥門，以免滅菌器中液體噴出。

高壓蒸汽滅菌法為濕熱滅菌法，其優點有三：一濕熱滅菌時菌體蛋白容易變性，二濕熱穿透力強，三蒸氣變成水時可放出大量熱增強殺菌效果，因此，它是效果最好的滅菌方法。凡耐高溫和潮濕的物品，如培養基、生理鹽水、衣服、紗布、棉花、敷料、玻璃器材、傳染性污物等都可應用本法滅菌。

目前已出現全自動電熱高壓蒸汽滅菌器，操作簡單，使用安全。

（二）干熱滅菌器(烤箱)

1. 干熱滅菌器是由雙層鐵板制成的方形金屬箱，外壁內層裝有隔熱的石棉板。箱底下放置大型火爐，或在箱壁中裝置電熱線圈。內壁上有數個孔，供流通空氣用。箱前有鐵門及玻璃門，箱內有金屬箱板架數層。電熱烤箱的前下方裝有溫度調節器，可以保持所需的溫度。

2. 用法：將培養皿、吸管、試管等玻璃器材包裝后放入箱內，閉門加熱。當溫度上升至160～170℃時，保持溫度2 h，到達時間后，停止加熱，待溫度自然下降至40℃以下，方可開門取物，否則冷空氣突然進入，易引起玻璃炸裂；且熱空氣外溢，往往會灼傷取物者的皮膚。一般吸管、試管、培養皿、凡士林、液體石蠟等均可用本法滅菌。

（三）除菌濾器

除菌濾器簡稱濾菌器。種類很多，孔徑非常小，能阻擋細菌通過。它們可用陶瓷、硅藻土、石棉或玻璃屑等制成。下面介紹幾種常用的濾菌器。

1. 構造