原理
微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態(tài)，才能在一定的時(shí)間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。
選用優(yōu)良菌株，根據(jù)生理生化特征隔絕空氣使其處于休眠狀態(tài)或者代謝處于最低的狀態(tài)，生長繁殖受抑制從而降低變異率。
細(xì)菌、酵母菌、絲狀真菌均可用此法保藏，前兩者可保藏2年左右，有些絲狀真菌甚至可保藏14-17年之久。此法較液氮、冷凍干燥法簡便，不需要特殊設(shè)備。
材料與儀器
細(xì)菌 酵母菌 放線菌 霉菌 肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基 滅菌水 滅菌脫脂牛乳 五氧化二磷 濾紙 安瓿管 棉塞 滅菌鍋 培養(yǎng)皿 試管 鑷子 干燥器 溫箱 酒精燈 冰箱 真空泵 真空壓力表
步驟
一、將濾紙剪成0.5×1.2 cm的小條，裝入0.6×8 cm的安瓿管中，每管1-2張，塞以棉塞，1.05 kg/cm2，121.3℃滅菌30分鐘。
二、將需要保存的菌種，在適宜的斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)，使充分生長。
三、取滅菌脫脂牛乳1-2 ml滴加在滅菌培養(yǎng)皿或試管內(nèi)，取數(shù)環(huán)菌苔在牛乳內(nèi)混勻，制成濃懸液。
四、用滅菌鑷子自安瓿管取濾紙條浸入菌懸液內(nèi)，使其吸飽，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。
五、將安瓿管放入內(nèi)有五氧化二磷作吸水劑的干燥器中，用真空泵抽氣至干。
六、將棉花塞入管內(nèi)，用火焰熔封，保存于低溫下。
七、需要使用菌種，復(fù)活培養(yǎng)時(shí)，可將安瓿管口在火焰上燒熱，滴一滴冷水在燒熱的部位，使玻璃破裂，再用鑷子敲掉口端的玻璃，待安瓿管開啟后，取出濾紙，放入液體培養(yǎng)基內(nèi)，置溫箱中培養(yǎng)。
