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人肝癌細胞(CSQT-2)

人肝癌細胞CSQT-2介紹:人肝癌細胞CSQT-2屬專利保藏,其特征特性尚未公開。 
人肝癌細胞CSQT-2特性:
1
 來源:肝癌
2
 形態:上皮細胞樣
3
 含量:>1x106 /mL
4
 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5
 規格:T75瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存:可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式

1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;

2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

人肝癌細胞CSQT-2用途:僅供科研使用。
人肝癌細胞CSQT-2培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1
 準備MEM培養基(MEM-EBSS:Minimum Essential Medium(MEM Eagles with Earle’s Balanced Salts) ),90%;優質胎牛血清,10%
2
 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%
3
 凍存液:90%完全培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1
 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2
 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 
棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 
2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 
6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 
細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3
細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。