一、大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞簡(jiǎn)介:
2. 組織來(lái)源:腦組織
3. 產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞分離自腦皮層組織;
皮層神經(jīng)元細(xì)胞是構(gòu)成中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元是具有長(zhǎng)突觸(軸突)的細(xì)胞,它由細(xì)胞體和細(xì)胞突起構(gòu)成。在長(zhǎng)的軸突上套有一層鞘,組成神經(jīng)纖維,它的末端的細(xì)小分支叫做神經(jīng)末梢。細(xì)胞體位于腦、脊髓和神經(jīng)節(jié)中,細(xì)胞突起可延伸至全身各器官和組織中。細(xì)胞體是細(xì)胞含核的部分,其形狀大小有很大差別,直徑約4-120微米。核大而圓,位于細(xì)胞中央,染色質(zhì)少,核仁明顯。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有斑塊狀的核外染色質(zhì),還有許多神經(jīng)元纖維。
細(xì)胞突起是由細(xì)胞體延伸出來(lái)的細(xì)長(zhǎng)部分,又可分為樹(shù)突和軸突。每個(gè)神經(jīng)元可以有一或多個(gè)樹(shù)突,可以接受刺激并將興奮傳入細(xì)胞體。每個(gè)神經(jīng)元只有一個(gè)軸突,可以把興奮從胞體傳送到另一個(gè)神經(jīng)元或其他組織,如肌肉或腺體。
皮層神經(jīng)元細(xì)胞是大腦皮質(zhì)的主要組成細(xì)胞之一,是大腦進(jìn)行功能活動(dòng)調(diào)節(jié)的基本單位,參與動(dòng)物多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過(guò)程。通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察顯示神經(jīng)元從貼壁、伸出突起開(kāi)始;突起逐漸增多,而后突起進(jìn)一步增多并逐漸成網(wǎng),同時(shí)細(xì)胞胞體增大,周邊光暈明顯。10-12d細(xì)胞最為豐滿,隨后神經(jīng)元開(kāi)始裂解,突起逐漸減少,
細(xì)胞已退化變性,輪廓模糊,光暈消失,細(xì)胞變形。明舟生物(mingzhoubio)生產(chǎn)的
大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),
細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)MAP-2免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5. 培養(yǎng)基信息:
Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
三、使用方法
大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞是一種高度分化細(xì)胞,屬于不增殖細(xì)胞群,不能增殖和傳代,只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時(shí)間較短;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),此細(xì)胞不建議傳代。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25
細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 細(xì)胞消化
1) 吸出T25
細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待
細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4) 待
細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響
細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張
細(xì)胞照片,記錄
細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知
細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。
備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考