一、產品簡介
1. 產品名稱:小鼠真皮微血管內皮細胞
2. 組織來源:皮膚組織
3. 產品規格:5×105 cells/T25細胞培養瓶
4. 細胞簡介:
小鼠真皮微血管內皮細胞分離自真皮組織;真皮,位于表皮深層,向下與皮
下組織相連,真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質
內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈
性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網狀層。真皮的結構組成是膠原蛋
白、彈性纖維以及基質。微血管內皮細胞(MEC)在炎癥反應、腫瘤生長、創面
愈合過程中起著非常重要的作用。在創面愈合研究領域,由于表皮細胞、真皮成
纖維細胞體外培養技術的成熟,人們對這兩種細胞早已進行了大量深入的研究。
與之相比,對參與創面愈合過程的另一種主要細胞——真皮微血管內皮細胞,則
因其體外分離培養技術的困難而使相關的研究受限。
本公司生產的小鼠真皮微血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結
合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量
約為5×105 cells/瓶;細胞經CD31/vWF免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含
有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5. 培養基信息:
M199、FBS、內皮細胞生長添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、
Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用小鼠真皮微血管內皮細胞專用完全培養基(產品貨號:CM-M201)作
為體外培養小鼠真皮微血管內皮細胞的培養基。
二、細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
三、使用方法
在技術部標準操作流程下,小鼠真皮微血管內皮細胞可傳2-3代左右;建議您收到
細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培
養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待
細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全
培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技
術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們
聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到
解決。
5. 該細胞只可用于科研。
備注:由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考