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小鼠真皮微血管內皮細胞

 一、產品簡介

1. 產品名稱小鼠真皮微血管內皮細胞

2. 組織來源:皮膚組織

3. 產品規格5×105 cells/T25細胞培養瓶

4. 細胞簡介

小鼠真皮微血管內皮細胞分離自真皮組織;真皮,位于表皮深層,向下與皮

下組織相連,真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質

內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈

性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網狀層。真皮的結構組成是膠原蛋

白、彈性纖維以及基質。微血管內皮細胞(MEC)在炎癥反應、腫瘤生長、創面

愈合過程中起著非常重要的作用。在創面愈合研究領域,由于表皮細胞、真皮成

纖維細胞體外培養技術的成熟,人們對這兩種細胞早已進行了大量深入的研究。

與之相比,對參與創面愈合過程的另一種主要細胞——真皮微血管內皮細胞,則

因其體外分離培養技術的困難而使相關的研究受限。

   本公司生產的小鼠真皮微血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結

合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量

約為5×105 cells/瓶;細胞經CD31/vWF免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含

HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5. 培養基信息

M199FBS、內皮細胞生長添加劑、HeparinAscorbic AcidHydrocortisone

PenicillinStreptomycin

我們推薦使用小鼠真皮微血管內皮細胞專用完全培養基(產品貨號:CM-M201)作

為體外培養小鼠真皮微血管內皮細胞的培養基。

二、細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片

三、使用方法

在技術部標準操作流程下,小鼠真皮微血管內皮細胞可傳2-3代左右;建議您收到

細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽

和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。3. 細胞傳代

1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培

養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待

細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全

培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;

4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

四、注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技

術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們

聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到

解決。

5. 該細胞只可用于科研。

備注:由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考