產品名稱 |
Hce-8693 [HCE8693] |
商品貨號 |
MZ-2402 |
中文名稱 |
人盲腸腺癌細胞(未分化) |
種屬來源 |
人 |
組織來源 |
腸 |
細胞形態 |
上皮細胞樣 |
生長特性 |
貼壁 |
培養條件 |
1640 |
細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
特征特性 |
Hce-8693源自一位男性盲腸未分化腺癌患者的淋巴結轉移的病理切片。它的倍增時間是30.4小時,有絲分裂指數是28.8%。 電子顯微鏡檢查呈現巨核,核仁分界明顯,微絲豐富,并有分泌顆粒。染色體模式數是48。 在軟瓊脂上成克隆的比率是8%。 細胞中和培養液上清中CEA陽性。 當異體移植到裸鼠時,Hce8693細胞長成的瘤與患者原病灶一樣,在細胞質中有阿爾新藍陽性物質 |
細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 |
細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |