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U118MG(U-118 MG)
U118MG(U-118 MG)
規格:
貨期:
編號:MZ-2119
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 U118MG(U-118 MG)
商品貨號 MZ-2119
中文名稱 人腦星形膠質母細胞瘤
細胞數量 1*10^6
組織來源
細胞形態 混合型,貼壁生長
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
培養基 DMEM+10%FBS+1%P/S
細胞描述 據報道來自不同個體的膠質母細胞瘤細胞株U-118 MG (HTB-15) 和 U-138 MG (HTB-16)有著一致的VNTR和相近的STR模式。U-118 MG 和 U-138 MG細胞遺傳學上很相似并有至少六個衍生標記染色體。這是1966年至1969年間J. Ponten和同事從惡性神經膠質瘤中構建的細胞株中的一株(其它包括ATCC HTB-14和 ATCC HTB-16 and ATCC HTB-17)。
培養條件 Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃
細胞凍存 Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%(for reference)Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞運輸 干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25細胞瓶)
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