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      小鼠輸卵管上皮細胞
      小鼠輸卵管上皮細胞
      規(guī)格:
      貨期:
      編號:MZ-3903
      品牌:Mingzhoubio

      活化細胞
      凍存細胞
      熒光標記細胞

      規(guī)格:
      T25瓶
      凍存管

      產(chǎn)品名稱 小鼠輸卵管上皮細胞
      商品貨號 MZ-3903
      組織來源 昆明、C57小鼠(出生3-4周)3-5只,雌性
      規(guī)格 5×105cells/T25培養(yǎng)瓶
      生長特性 貼壁
      細胞形態(tài) 上皮細胞樣
      細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
      細胞描述 輸卵管是卵子運輸、儲存、獲能,以及卵母細胞采取、運送、成熟、受精和早期胚胎發(fā)育的重要場所。輸卵管上皮細胞體外培養(yǎng)可以用于飼養(yǎng)層細胞,與胚胎共培養(yǎng),克服胚胎的發(fā)育阻滯現(xiàn)象。因此,體外培養(yǎng)輸卵管上皮細胞,不但可以進一步了解影響生殖微環(huán)境變化的因素,而且還可以建立輸卵管上皮細胞與胚胎共培養(yǎng)體系,研究輸卵管上皮細胞對胚胎體外發(fā)育的影響。
      細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
      細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
      細胞凍存步驟 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
      姓名 手機號(微信同號) QQ
      梅經(jīng)理 17280875617 1438578920
      胡經(jīng)理 13345964880 2438244627
      周經(jīng)理 17757487661 1296385441
      于經(jīng)理 18067160830 2088210172
      沈經(jīng)理 19548299266 2662369050
      李經(jīng)理 13626845108 972239479